La cromotografía líquida solo se utiliza como método de separación de componentes nunca como una técnica de análisis (ni cuantitativa ni cualitativamente). En esta un líquido (fase móvil) circula en contacto con un sólido o un líquido inmiscible (fase móvil). Cuando se agrega una sustancia al flujo de la fase móvil cada analito de ella avanzará a una velocidad diferente que depende de la afinidad con cada fase. Esto implica que cada sustancia quedará separada una vez que haya traspasado la columna.
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- Clasificación de la cromotografía líquida
- Cromatografía de adsorción (líquido-sólido)
- Cromatografía de reparto/adsorción (fases ligadas químicamente)
- Cromatografía de intercambio iónico
- Cromatografía de exclusión molecular
- Clasificación según fase estacionaria
- Partes del cromatógrafo de líquidos
- Esquema de un cromatógrafo de líquidos
Clasificación de la cromotografía líquida
Cromatografía de adsorción (líquido-sólido)
En esta la fase estacionaria es un adsorbente y la separación se realiza en etapas repetidas de adsorción-desorción.Cromatografía de reparto/adsorción (fases ligadas químicamente)
En esta la separación se basa en una distribución del soluto entre la fase móvil y la fase estacionaria.Cromatografía de intercambio iónico
Este tipo de cromatografía se utiliza cuando la fase estacionaria posee en su superficie grupos ionizados que pueden retener de modo selectivo a iones de signo contrario que están presentes en la fase móvil.Cromatografía de exclusión molecular
En esta cromotografía, la fase estacionaria es un material poroso de tamaño controlado que permite el ingreso de ciertas moléculas de manera selectiva y deja fuera otras de un tamaño mayor.Clasificación según fase estacionaria
Cromatografía de fase normal
La fase estacionaria posee puntos de alta polaridad activos y las interacciones que ocurren con el soluto son específicas del grupo activo. La fase estacionaria puede ser un adsorbente como sílice o alúmina o bien, un soporte al que se unen moléculas orgánicas las cuales tienen grupos funcionales de alta polaridad (amino, ciano, etc.).Cromatografía de fase reversa (inversa)
La fase estacionaria posee una naturaleza apolar (como grupos de hidrocarburos) y las interacciones son inespecíficas.Partes del cromatógrafo de líquidos
- Dispositivo de suministro de eluyentes (bomba y dispositivo mezclador de eluyentes). Tiene por función suministrar un caudal constante y libre de pulsos de la fase movil. El mezclador es importante cuando se realiza una cromotografía cuya fase móvil cambia de acuerdo al tiempo.
- Dispositivo de inyección
- Conducciones y conexiones
- Detector y registrador
- Columna
- Componente opcionales
- Inyectores automáticos
- Colectores de fracciones
- Hornos termostatizados para las columnas
- Sistemas de tratamiento de datos
Esquema de un cromatógrafo de líquidos
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